Набор «АмплиСенс® U.parvum / U.urealyticum / M.hominis-скрин-титр-FL» для количественного определения 3-х возбудителей в одной пробирке. Готовые ПЦР-пробирки 0,2 мл, FRT

Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме "реального времени".

Набор включает полный комплект реагентов для одного этапа анализа - амплификации ДНК возбедителя. Для экстракции ДНК из клинического материала требуются дополнительный набор для выделения.
В составе реакционной смеси присутствуют флуоресцентно-меченые олигонуклеотидные зонды, которые гибридизуются с комплементарным участком амплифицируемой ДНК-мишени, в результате чего происходит нарастание интенсивности флуоресценции. Это позволяет регистрировать накопление специфического продукта амплификации путем измерения интенсивности флуоресцентного сигнала.
Детекция полученного сигнала проводится одновременно с проведением реакции – в режиме "реального времени".

Количественное определение ДНК основывается на существовании линейной зависимости между исходной концентрацией ДНК-мишени в исследуемом образце и циклом начала экспоненциального увеличения флуоресцентного сигнала (пороговый цикл, Cycle threshold, Ct).

В предлагаемом тесте концентрация ДНК U.parvum, U.urealyticum и M.hominis определяется в двух вариантах.

• В первом варианте определяется количество геномных эквивалентов клеток микроорганизмов в 1 мл клинического образца (ГЭ/мл). Полученные таким образом значения отражают абсолютную концентрацию данных микроорганизмов в клиническом материале.
• Во втором варианте рассчитывается соотношение количества геномов U.parvum, U.urealyticum и M.hominis на количество геномов клеток слизистой человека. Для этой цели в ПЦР-смеси наряду с праймерами и зондами к U.parvum, U.urealyticum и M.hominis присутствуют праймеры и зонды к фрагменту гена β-глобина человека, а в растворах ДНК калибраторов наряду с калибраторами ДНК U.parvum, U.urealyticum и M.hominis присутствуют калибраторы человеческой ДНК. Полученные таким образом относительные значения концентрации ДНК U.parvum, U.urealyticum и M.hominis к ДНК человека могут отражать плотность обсемененности данными микроорганизмами клеток слизистой. Кроме того, ДНК человека является эндогенным внутренним контролем, отражающим качество получения клинического материала.